Bonjour,je fais un tpe sur les avantages et les inconvénients du dopage et plus particulièrement sur l’EPO et les testosterones. Je souhaiterai connaitre le fonctionnement de la chromatographie gazeuse et de la spectrométrie de masse pour le depistage de la testosterone. Merci
Amélie,
La chromatographie en phase gazeuse permet de séparer des petites molécules volatiles ou devenant volatiles après une transformation chimique préalable. Il faut opérer dans des colonnes spéciales portées à haute température afin de maintenir les molécules sous forme gazeuse pendant leur traversée. Les échantillons sont dissous dans un solvant vaporisable n’ayant aucune affinité pour les matériaux qui constituent la colonne. Ces échantillons sont transformés de liquide en vapeur dans une chambre d’injection préchauffée à température élevée, ce qui permet de les volatiliser et de les entraîner à travers la colonne par un courant de gaz inerte appelé gaz vecteur. La séparation des molécules à analyser peut résulter d’un partage entre le support solide lui-même et le gaz. C’est la chromato gaz-solide. On comprend que les molécules qui ont une forte affinité pour le support vont y adhérer provisoirement et que les autres seront entraînées par le gaz.
Le plus souvent les molécules à séparer sont partagées par leur affinité avec une phase liquide qui imprègne le support inerte. C’est la chromato gaz-liquide. Les molécules vont ainsi sortir de la colonne séparément, les premières à sortir seront celles qui ont peu d’affinité pour le liquide puisqu’elles sont restées dans le gaz.
On les détecte à leur sortie par un appareil appelé détecteur qui utilise des méthodes physiques :
ionisation de flamme. Le gaz vecteur est mélangé à de l’hydrogène qui est brûlé entre deux électrodes. Un certain courant qui circule entre ces deux électrodes change d’intensité quand le gaz vecteur n’est plus pur et contient d’autres molécules. Le signal est amplifié et transmis à un enregistreur.
Capture d’électrons. Le système comporte une source d’électrons par décomposition d’une substance radio active. Ces électrons se fixent sur les molécules sortant de la colonne et les transforment en radicaux libres négatifs qui seront attirés vers l’anode. Chaque passage de molécules provoque une variation d’intensité du courant entre les deux électrodes. Le signal électrique sera transmis à l’enregistreur. Cette détection n’est utilisable que pour des molécules capables de fixer des électrons (électrophiles).
Pour les substances contenant du phosphore il y a des détecteurs à ionisation de flamme doubles donc deux enregistreurs.
La détection d’azote utilise ce même dernier principe et travaille sans oxygène.
Les colonnes de chromato gazeuse sont souvent couplées à la spectro de masse qui permet d’identifier les molécules ou de mesurer la proportion d’isotopes lourds éventuels dans chaque pic.
Digérez déjà cette partie et revenez plus tard pour la spectro de masse.
Bon travail
AC
Suite
Amélie
Spectrométrie de masse : principe.
Les molécules gazéifiées sont transformées en ions par bombardement avec des électrons dans une chambre d’ionisation (un canon à électrons comparable à un oscillographe cathodique)
Ces molécules ionisées sont collectées, focalisées et accélérées par des différences de potentiel électrique. Ceci se passe dans une chambre d’accélération.
Ces ions qui se déplacent constituent ainsi un courant qui est soumis à un champ d’induction magnétique B perpendiculaire de telle sorte qu’ils subissent une force perpendiculaire au champ magnétique et à leur trajectoire jusque là rectiligne. L’application de cette force dévie le trajet de chaque ion en fonction du rapport de sa charge q sur sa masse m (donc de q/m)
Cette force constante, toujours perpendiculaire à la trajectoire, ne modifie pas la vitesse v de l’ion mais l’oblige à parcourir une trajectoire circulaire dont le rayon R est donné par la relation Bqv = mv2 / R
Ainsi les points d’impact des ions de masse différente se font en des points différents d’un écran intercepteur, mais à condition que leur vitesse soit identique en grandeur et en direction. Ceci est obtenu par des astuces techniques associant plusieurs champs magnétiques déflecteurs.
Les spectrographes de masse avaient pour récepteur des enregistreurs photographique, les spectromètres de masse utilisent comme récepteurs des collecteurs d’ions.
Les courants d’ions ont des intensités de l’ordre de 10-14 ampères, il faudra par conséquent des systèmes d’amplification.
AC